技术服务

Technical service

(1)业务简介

ES打靶技术,相对于CRISPR/Cas9技术较适用于制作编辑策略复杂或插入片段较大的小鼠模型,是以ES细胞为媒介获得基因编辑小鼠模型的打靶技术,通过同源重组将外源DNA定点整合入ES细胞基因组中,可制作KO、cKO、KO-first、KI/PM基因编辑小鼠。构建KO模型一般需要7-10个月,CKO和KI小鼠模型9-12个月。

(2)技术原理

ES细胞打靶技术,即建立在ES细胞与DNA同源重组等技术基础上的分子生物学技术。利用同源重组技术对ES细胞特定位点的基因进行改造,通过显微注射或者胚胎融合的方法将经过遗传修饰的ES细胞引入受体胚胎内。遗传修饰的ES细胞仍然保持分化的全能性,可以发育为嵌合体动物的生殖细胞,使得修饰的遗传信息经生殖系遗传。

ES细胞打靶技术原理示意图

(来源:Gene targeting in mice: a review. Methods Mol Biol. 2013;1064:315-36. doi: 10.1007/978-1-62703-601-6_23. PMID: 23996268; PMCID: PMC4524968.)



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